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组织Co-IP
组织Co-IP-详情"免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用，是研究蛋白互作的经典方法。在组织Co-IP实验过程中，为了保证足够多的蛋白浓度以维持原本存在的蛋白质互作状态，通常需要准备足够多的动物或者组织样品。且Co-IP的实验条件很难一次成功，常需要反复摸索，尤其当蛋白丰度较低、相互作用力不强、使用不易提取蛋白的组织等情况时
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2023-09-18 |
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蛋白MS
蛋白MS-详情"几十年来，质谱（MS）一直是zuì广泛使用的高通量蛋白分析的“金标准”技术。蛋白MS分析通过将蛋白酶解消化为小分子肽段来进行肽段序列识别，它兼具高扫描速度、高灵敏度和分析复杂混合物的能力，是一种非常适合分析蛋白质的技术。此外，现在有无数基于MS分析的蛋白质组学具有独特的样品制备技术、质量分析器和数据软件的组合。质谱结果的搜库解析是依赖于数据库和统计学计算的，不同搜库引擎的匹配过程和打分模式不尽
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2023-09-18 |
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无标签LC-MS/MS蛋白质组学分析
无标签LC-MS/MS蛋白质组学分析-详情"随着高效液相分离技术（HPLC）和静电场轨道阱（Orbitrap）质谱技术的发展，液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）成为目前蛋白质组学分析的主要技术。基于LC-MS/MS的蛋白质组学技术取得了重大进展，在灵敏度、选择性、重现性、蛋白质覆盖率和成本效益方面的表现越来越好。基于LC-MS/MS的蛋白质组学技术为量化复杂的蛋白质混合物提供了一种高通量的方法，其量化能力比那些基于免疫亲和力的传统量化方法（
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2023-09-18 |
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蛋白N端糖基化
蛋白N端糖基化-详情"蛋白糖基化修饰是糖链分子在糖基转移酶的催化作用下与肽链氨基酸侧链活性基团反应生成糖苷键，从而使糖链连接到蛋白质上。蛋白N端糖基化是将含有14个单糖的糖链（Glc-3-Man-9-GlcNAc-2）与蛋白质上天冬酰胺（Asn）的酰胺基团以N-糖苷键的形式共价连接，从而使糖链由磷酸多萜醇载体上转移至蛋白质上的过程。由于N-糖基转移酶只能识别特定的氨基酸基序Asn-X-Thr/Ser（X可以是除脯氨酸之外任何氨基酸）进行修饰，
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2023-09-18 |
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LC-MS/MS蛋白质组学分析
LC-MS/MS蛋白质组学分析-详情"基于液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）的蛋白质组学可以揭示定量蛋白质组的状态，从而提供深入了解相关细胞或组织生物化学状态的机会。蛋白质并不是孤立的分子而是具有三维结构的物质，并且协同其他蛋白质分子一起参与调控各种生命活动，它们的空间结构和模块构成与其表达水平同样重要。基于LC-MS/MS的蛋白质组学方法结合生物化学手段，对于研究蛋白质组的结构单位有很大帮助作用。目前，随着高校液相色谱
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2023-09-18 |
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N-糖样品制备和分析
N-糖样品制备和分析-详情"在开始基于质谱的N-糖检测之前，需要进行N-糖样品制备和分析，主要包括糖蛋白富集、N-糖释放与标记、N-糖衍生化等内容。糖蛋白富集：由于正常生理情况下糖基化蛋白的丰度较低，因此需要对N-糖基化修饰蛋白（即糖蛋白）进行富集，富集方法主要包括凝集素富集、硼酸亲和富集、亲水色谱HILIC富集和肼化学富集等。其中HILIC富集应用比较多，HILIC富集采用jí性固定相和非jí性流动相的色谱技术，利用糖肽和糖
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2023-09-18 |
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蛋白质组学LC-MS
蛋白质组学LC-MS-详情"蛋白质组学是指大规模地对蛋白质的表达水平、翻译后修饰、蛋白质相互作用等进行研究。蛋白质组研究不仅可以全景式地揭示生命活动的分子本质，还能阐明生命在生理或病理条件下的变化机制。近年来，色谱和质谱技术的进步驱动了蛋白质组学的快速增长，逐步实现了“深度覆盖”。液相色谱串联质谱（LC-MS）是蛋白质组学研究中zuì常用到的技术，随着高效液相色谱技术（HPLC）和质谱（MS）技术的发展，基于LC-MS的
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2023-09-18 |
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N糖检测
N糖检测-详情"N糖对糖蛋白的结构和功能具有重要作用，N糖检测是解析N-糖基化过程及糖蛋白功能的重要前提之一。由于糖蛋白释放的N糖数量有限，N糖分析一直非常具有挑战性，质谱法由于其高灵敏度和选择性而成为N糖检测分析的重要工具。目前，可使用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）对N糖结构进行解析，其可用于分析简单或复杂基质中N糖。N糖检测流程：在进行质谱检测之前，需要对样
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2023-09-18 |
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